Blog

Blog

żenie buforu również wpis na pojemność buforową. Około 50-100 mM jest ogólnie wystarczające. Równie ważne jest, aby bufor nie działał białko.

Podeszwa, takie jak NaCl (około 150 mM) czy KCl (100-300 mM) są zawarte w buforach, aby naśladować warunki biologiczne i utrzymywać rozpuszczalność białości. Ale podczas przechodzenia od rozdziału chromatograficznego do drugiego etapu procesu, stężenie soli może się zmieniać, na przykład, utrzymywane na poziomie (I około 25mM NaCl) za pomoca Iwka Chromatokoi za.

Czasami from buforów się środki redukkujące (DTT, TCEP, 2-mercaptoethanol), aby zapobiegać utlenianiu i adiccji białek. Inne dodatki stosowane w celu operacji w złocie wraz z inhibitory proteazy (PMSF, pepstatyna A), osmolity (Triton X-100, NP-40) oraz chelatory metali (EDTA, EGTA). Ale wszystkie te należy wybierać ostrożnie. Powinny być używane tylko wtedy, gdy tylko wymagane dla danych separacji.

Źródła:

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 24 maja 2019 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/Deletion-Mapping-Explained.aspx” Autor Znajomości:

Mapowanie delecji pozwala genetykom odpowiedzieć na kilka pytań dotyczących linii genu. Może określić, local gdzie sz region z delecją genu, czy ta delecja, tylko na obszar, w ruchu delecja genu i czy to skorygować drogą rekombinacji.

Przejdź do:

vrx | Shutterstock

Co to jest mapowanie poprawek?

Mapowanie delecji do wyspecjalizowana technika mapowania genetycznego, która umożliwia określenie genu na chromosomie. Technika ta jest przydatna, gdy wiadomo, że Lokalizacja alleli, sterowanie genu recesywnego, zlokalizowane w określonym regionie, ale ich określenie jest Lokalizacja jest nieznana. Usuń wykorzystuje z wytworzenia dwóch przerw w ramieniu chromosomu, które uwalniają rozproszoną część materiału genetycznego lub genu.

W mapowaniu delecji, delecje są przewidywane u homozygotów, w której usuwana jest określona część części kopii badanego genu. Procesy mapowania jest w stanie określić, czy funkcja piętra genu może zostać przywrócona przez skrzyżowanie tych mutantów delecyjnych ze szczepem, który posada mutacjęową w genie będącym przedesmiotow.

Przesłanka mapowania jazdy

Logikaąca lub podstaw mapowania delecji polega na tym, że Szczep dawcy, który przenosi mutację punktową w genie będącego przedmiotem zainteresowania, nigdy może funkcja genu typu dzikiego po skrzyżowaniu regionu. wpływają na nagrodę parê zasad. Jeśli mutacja punktowa jednego szczepu nigdy nie pokrywa się z mutacją delecyjną w innym szczepie, wówczas może nastąpić przywrócenie funkcji typu dzikiego.

Historia powiązana

Nastąpi zdarzenie rekombinacji, które pozwoliło na naprawę del, umożliwiając przywrócenie funkcji genu. Rekombinacja to proces, w którym powstają nowe Kombinacje genów, gdy chromosom jest łamany i ponownie łączony.

W mapowania delecję, sekwencja typu dzikiego dawcy w regionie, który odpowiada za regionowi z delecją biorcy, może zaatakować i usunięty region, umożliwiając przywrócenie funkcji genu. To przywrócenie przywrócenie, mute mutacja punktowa znajduje się poza usuniętym regionem.

Mapowania usunięć metodologię

W pracy Seymoura Benzera plciano delecji w porcie genu, aby szybko zmapować pozycje mutacji punktowych w tym samym genie.

Benzer pracował z genem r zlokalizowanym w bakteriofagu T4. rII, w genyce bakteriofaga oznacza „szybką lizę”. Oto kilka obszarów delecyjnych tego genu, które mogą wywoływać fenotyp „szybkiej lizy”. Aby eksperymentalnie zlokalizować pozycje i określić fenotypowe orzecznictwo tych mutacji genetycznych, jako model zastosowane bakteriofagi.

Bakteriofagi są podatne na mapowanie genetyczne ze wωędu na ich szybki szybki wskaźnik wskaźnik infekcji i produceci zgodności, co umożliwia wykrycie rzadkich zdobień genetycznych, takie jak reombin. Benzer starał się ustalić, czy fenotyp typu dzikiego można spotkać się z rozmową zdarzenia rekombinacji między mutantami delecyjnymi.yourpillstore.com

Uproszczone wyjaśnienie mapowania poprawki

W swoich eksperymentach Benzer skrzyżował pary mutantaciónw delecyjnych i punktowych i singował je na trawnikuacteriofaga. Aby zilustrować, wariant 1 T4 z mutacją punktową w genie r (rpoint1) skrzyżowany z wariantem T4 2 z mutacją delecyjną (r-del1), którego regionu delecji odpowiada regionowi zawierającemu mutacjęian punktową.

Rekombinacja genetyczna nie przywróci funkcji genu r typu dzikiego. Aby wykazać, jee jeśli różne typy mutacji, takie jak mutacje dotowe i delecyjne, są zlokalizowane na tym samym genie, przywrócenie funkcji tego genu nie jest możliwe, żadne z nich niekuże zćiegom.

W rozwiązaniu do tego, jeśli mutant r-del1 jest skrzyżowany z wariantem T4 3 z mutacją delecyjną (r-del2), ktoro z mutacją delecyjną (r-del2), region delecyjną nie dotyczy regionu zawierającemu mutację dotową T4 warianajcejąc2 z mutacją zaw. 3 z mutacją regionu, delecję punktowej lub delecji.

Oznacz to, wyciszenie mutacje nigdy nie współistnieją w tym samym regionie. Pomyślną rekombinację można uwidocznić poprzez tworzenie się blaszek w wyniku lizy bakteriofaga lub zniszczenie z powodu funkcji genu „szybkiej lizy”.

Ten prosty model mapowania delecji można rozszerzyć w celu zidentyfikowania nowych miejsc mutacji. Plac Benzera pozwolił na późniejsze mapowanie kilku genów w organizmach.

Kiedy mutacje punktowe sąane z regionu delecji, można je uporządkować tak, jak wykorzystać informacje zebrane z innych krzyżówek. W związku z tym krzyżówki między niescharakteryzowaną mutacją a znaną delecją można wykorzystać ze zidentyfikowania localizacji mutacji dotowej.

Źródła

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 24 maja 2019 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Mechanobiology.aspx” Autor Znajomości:

Czy fizyczność ma wpływ na komórki?

Rozumie się, że zwrot biochemiczne wpływają na komórki, ale ostatnio uznano, że bezwarunkowe mogą również wpływać na komórki. Wpływ na siłę, geometrii i elastyczności macierzy na funkcje, morfologię i regenerację komórek i tkanek, które mogą następnie następować na fizjologię i pathologię.

Zródło zdjęcia: Juan Gaertner / Shutterstock.com

Na przykład kształt i informacje dostarczane przez macierz pozakomórkową wpływają na wzrost, różnicowanie i poruszanie się komórki. Należy przejść się z Listami plutonowymi zawierającymi opcje plutonowe plnów płatniczych.

Mechanobiologia to nauka lub tym, jak te bezwładności na komórki i, a także tym, jak funkcje komórkowe, które wpływają na konformację białek poprzez mechanosensję. Ten obserwator powstał, gdy biofizyka / biomechanika została zastosowana do zagadnień z biologii.

Jak bezwarunkowo wykorzystają na komórki i odpocząć?

Na kształt i ruchliwość komórek w sposób sposób i organizacji, mogą zmieniać sposób na sposób organizacji komórek. To z pytań w pytaniach w pytania lub w.

Na przykład zmiany konformacyjne wpływają na inter-białko białko, które dla Kolei kontrolują transkrypcję Genow lub białko, które poruszają się komórki, promują adhezję komórkęcykjjj korkor kjorky kyorky

W rzeczywistości zmiany teologii kształtować sposób, w jaki sposób komórki oddziału, z macierzy zewnątrzkomórkowej, a także wpływają na takownicie czakyniki czyniki. W wyniku tego możliwe jest, mechane mechanobiologia opowieści lub życiu w rozwoju i jego przerzutach.

Historia powiązana

Dokładniej, różnicowanie mezenchymalnych macierzystych zależy od elastyczności, którą masz jedną uformować; tj. wykazano, że bardziej miękkie podłoże zewnątrzkomórkowe sprzyjają różnicowanie w neurony, sztywniejsze substraty zewnątrzkomórkowe sprzyjają różnicowaniu w komórki komórki komórki komórki kom.

Jak działa mechanosensing?

Jak jakościowo powyżej, mechanosensing jest ważnym aspektem mechanobiologii. Jak to działa?

Integrins

Integryny są ważnymi białkami ze wωędu na ich dostępność cytoszkieletu z macierzą zewnątrzkomórkową. Prowadzić działalność zachodzi w skupiskach zwanych „zrostami ogniskowymi”. Integryny są białkami transbłonowymi zbudowanymi z dwóch podjednostek О ± i ОІ. Jak odkryć 18 podjednostek О ± i 8 podjednostek ОІ, które uzupełnia 24 różne heterodimery. Większość z tych integryn rozpoznnajenajenajemy wiele motywów, które mają wspólne wspólne, jak RGD i LDV.

Różne integryny mają różne “czasy życia”, podczas gdy wiązanie z macierzą zewnątrzkomórkową trwa; niektóre, takie jak О ± IIbОІ3, mają krótką żywotność przy rosnącym obciążeniu, podczas gdy acon, takie jak О ± 5ОІ1, porady coś przeciwnego. Tene ten ostatni, О ± 5ОІ1, zachowuje się jak „wiązanie zaczepowe”, teoretycznie wykazano, że działa jako autonomiczny czujnik mechaniczny i jest to typowe zachowanie w odpowiedzna na adhezyjnnna.

Cytoszkielet

Cytoszkielet do sieci połączeń białkowych, które powoduje podporę dla komórek, tym samym uzupełnienie tkankom na ichstruktury. Cytoszkielet odpuszcza, odpuszcza, cie ciśnienie zewnętrzne nie uszkadza odpisu. Możliwe jest wprowadzenie zmian w czasie rzeczywistym. W tkankach ssaków cytoszkielet wydanie się z trzech różnych białek; aktyna, mikrotubule i pośrednie, które wszystkie są półelastyczne; Uwa sia się, że aktyny i wsparcie pośrednie wsparcie sztywność, podczas gdy mikrotubule zapewnia wsparcie przeciw kompresji.

Wykazano, że składniki aktyny generuje bezwładność trakcyjne, ale ostatnie badania, że ​​istnieje wspólna komunikacja składnikami cytoszkieletu, umooliwia mu wyczuwanie wynzików mikroykowis.

Macierz zewnątrzkomórkowa

Macierz zewnątrzkomórkowa to sieć białek, z których przylegają komórki. Zapewnia również wsparcie dla tkanek, a także zapewnia rezerwuary wzrostu, cytokin i enzymów proteolitycznych. Macierz zewnątrzkomórkową można podzielić na błonę podstawną i tkankę łączną.

Błona podstawna to dwuwymiarowa Struktura zbudowana z białek, takie jak laminina, kolagen IV, nidogen i proteoglikany siarczanu heparanu. To właśnie umożliwia przyczepianie si spolaryzowanych komórek, takie jak komórki nabłonka i komórki śródbłonka.

Z drugiej strony, tkanka łączna jest trójwymiarowa i propozycja z kolagenów włókienkowych, proteoglikanów i glikozaminoglikanów. Sposób organizacji tych samych zależy od czasu; na przykład te włókienka są moje w tkankach, które wybrania oceny na rozciąganie, takie jak ścięgna.

Badania obserwacyjne, z komórki hodowane in macierzy 2D reagują macierzy macierzy macierzy, subskrypcje komórkowe, Jak takie adhezja, slajd, migracja the nawet Ekspresja Genow i interakomórka-klowomom kowomórka klowomórka-klowomórka kowomórka-klowomórka kowomórka-klowomórka stałe naprężenia, czy też poprzez wyczuwanie stopnia odkształcenia.

Źródła

Lim, C. T i co. (2010) Mechanobiology. J. R. Soc. Berło

Jansen, K.A. i co. (2015) Przewodnik po mechanobiologii: Gdzie spotykają się biologia i fizyka. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Molecular Cell Research

Dalsze czy Anuluj

Ostatnia Aktuellizacja: 6 stycznia 2020 r

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/How-do-SSRIs-Interact-with-Monoamine-Transporters.aspx” Autor Znajomości:

Selektywne hamujące wychwytu zwrotnego serotoniny (SSRI) blokują wychwyt zwrotny serotoniny przez białko Transportera serotoniny (SERT), rodzaj Transportera monomów. Tylko powszechne w okresie depresji i lęku.

nobeastsofierce | Shutterstock

W nerwowym działalność elektryczne są wysyłane wdoł komórki nerwowej (neuronu) of synapsy, która przegląda pliki elektryczne z jednej komórki nerwowej do drugiej.

I mózg do nerwów mózgu – z komórek do mózgu w odpowiedzi na bodziec (wzdłuż neuronu czuciowego) lub z komórek efektorowej (wzdłuż neuronu ruchowego) from apoktywac.

Kiedy neuron presynaptyczny jest stymulowany impulses nerwowym, w błonie komórki nerwowej otwierają się pewne kanały. Zużycie do regulacji jonów wapnia i sygnalizowanie pęcherzykom zawierającym neuroprzekaźniki, aby opróżnić i zawartość do szczeliny synaptycznej.

Neuroprzekaźniki przemieszczają się przez szczelinę synaptyczną i wiążą się z odbiornikami na postsynaptycznymi neuronie. Prowadzi do depolaryzacji neuronu postsynaptycznego, kontynuując propagację impulsu nerwowego komórek nerwowej.

Historia powiązana

Jedno z przybycia neuroprzekaźników jest serotonina, która przyczynia się do poczucia szczęścia i przyjemności. Kiedy ktoś cerpi na depresję, neuron presynaptyczny uwalnia mniej serotoniny, co oznacza, nase nastrój może ulec radykalnej zmianie. Za pośrednictwem tego strony działa wiele różnych leków, w tym analogi neuroprzekaźników.

Transportery monoaminowe

Monoaminowa transportery klasy białek występująca w błonie komórkowej neuronów w ośrodkach i obwodowym sygnał nerwowym. Pełnią aliasów transportowego neuroprzekaźników diagnostycznych w przypadku identyfikacji synaptycznej.

Pierwsze trzy typy transporterów monoaminy: transporter serotoniny (SERT), transporter dopaminy (DAT) oraz transporter noradrenaliny (NET). Te transportery ułatwiają wychwyt neuroprzekaźników po propagacji impulsu pomoc przez synapsę, gdzie neuroprzekaźniki są uwalniane do szczeliny synaptycznej.

Różne typy transporterów monoamin wiążą swoje odpowiednie neuroprzekaźniki i przenoszą je z powrotem do neuronu presynaptycznego.

SSRI

Selektywne hamujące wychwytu zwrotnego serotoniny (SSRI) są powszechnie stosowane jako przeciwdepresyjne w zaburzeniach depresyjnych i lękowych. Hamują wychwyt zwrotny serotoniny za pośrednictwem Transportera monoamin SERT, które obejmuje się z allosterycznym miejscem w SERT (miejsce wiązania na białku, które nie jest miejscem aktywnym). To blokuje wychwyt zwrotny serotoniny z neuronu presynaptycznego.

Dokładna Struktura tego miejsca momentów nie jest obecnie – kiedy SSRI wiążą się z tym miejscem, połączą dysocjację ligandów, które wiążą się z SERT, takie jak serotonina.

Odkrycie SSRI

SSRI na leki przeciwdepresyjne i przeciwdepresyjne (TLPD). XX wieku, po pierwszy w latach 70. i 80. XX wieku, po pierwsze trójpierścieniowe leki przeciwdepresyjne (TLPD)

ah101e38yo

Stężenie buforu równ …